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interactome:experiments:20191210 [2019/12/10 11:29]
dan [Table]
interactome:experiments:20191210 [2019/12/10 11:38] (current)
dan
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 == Re-trying with new cDNA sample. == == Re-trying with new cDNA sample. ==
- 
-##​Overview ​ 
-^ Step   ^ Description ​                                    ​^ ​ Date/​Initials ​  ^ Link protocol ​ ^ Link results ​ ^ 
-| 1      | Total RNA extraction from HEK293T cells         ​| ​ 20191122DEY ​    ​| ​               |               | 
-| 2      | 1st strand cDNA synthesis ​                      ​| ​ 20191122DEY ​    ​| ​               |               | 
-| **3**  | **Target gene amplification from cDNA sample** ​ | Current ​ |                |               | 
-| 4      | BP-reaction ​                                    ​| ​                 |                |               | 
-| 5      | Sanger sequence check                           ​| ​                 |                |               | 
- 
  
 #### Material #### Material
- 
-Before preparing: Check your primer Tm at NEB website (http://​tmcalculator.neb.com/#​!/​main with Phusion/HF buffer setting) 
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 #### Protocol #### Protocol
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 ^  Rvs Primer ​          ​| ​ PI 12    |  PI 12    |  PI 14   ​| ​ PI 14   ​| ​ PI 16   ​| ​ PI 16   ​| ​ PI 18  |  PI 18  |  PI 20     ​| ​ PI 20     | ^  Rvs Primer ​          ​| ​ PI 12    |  PI 12    |  PI 14   ​| ​ PI 14   ​| ​ PI 16   ​| ​ PI 16   ​| ​ PI 18  |  PI 18  |  PI 20     ​| ​ PI 20     |
 |  Tm                   ​| ​ 56       ​| ​ 56       ​| ​ 58      |  58      |  65      |  65      |  56     ​| ​ 56     ​| ​ 57        |  57        | |  Tm                   ​| ​ 56       ​| ​ 56       ​| ​ 58      |  58      |  65      |  65      |  56     ​| ​ 56     ​| ​ 57        |  57        |
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   *Mix the following reagents in one tube (ideally from top to bottom)   *Mix the following reagents in one tube (ideally from top to bottom)
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 \\ \\
- --- //​[[daney@sfc.keio.ac.jp|Dan Yamamoto-Evans]] 2019/11/25 14:48//+ --- //​[[daney@sfc.keio.ac.jp|Dan Yamamoto-Evans]] 2019/12/10 11:37//
 **Print at 96%** **Print at 96%**
  • interactome/experiments/20191210.1575944954.txt.gz
  • Last modified: 2019/12/10 11:29
  • by dan